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建立和利用猪全基因组基因敲除crispr/cas9技术筛选鉴定猪流感病毒感染相关的宿主(猪)基因

2018-03-02 09:41

在猪PK15细胞系中,证实了CRISPR/Cas9系统在猪细胞系中能高效地诱导猪基因敲除。设计和构建了猪全基因组基因敲除CRISPR/Cas9文库,该文库包含了65316个gRNAs、覆盖了13229个基因,其中含有5个gRNAs的基因有11400个基因、含有4个gRNAs的基因有1829个,并且全部的基因都含有至少2个gRNAs(最多不超过5个gRNAs/基因)。利用该猪全基因组基因突变gRNAs文库进行大规模的基因筛选,初步筛选出了140个候选宿主基因,并证实了其中的32个候选基因在病毒复制增殖中具有一定的调控作用。

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